电泳实验的技术原理
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电泳是带电颗粒在电场作用下,向着与其电荷相反的电极移动的现象。在一定pH条件下,每一种分子都具有特定的电荷(种类和数量)、大小和形状,水平核酸电泳槽公司,在一定时间内它们在相同电场中泳动速度不同,各自集中到特定的位置上而形成紧密的泳动带。这就是带电粒子可以用电泳技术进行分离、分析和鉴定的基本原理。
带电颗粒在电场中泳动的速度称迁移率或泳动度。
电泳时,陕西水平核酸电泳槽,带电颗粒(球形)在介质中受力平衡匀速运动,则有:
v = F阻/f = FE/f = E·q/f = E·q/(6π·r·η)
v — 泳动度 F阻 — 颗粒所受阻力
E — 电场强度 q — 颗粒所带电荷
r — 颗粒半径 η — 介质黏度
FE — 颗粒所受电场力 f — 摩擦系数
由上式可见:泳动度与球形分子半径、介质粘度、颗粒所带电荷以及电场强度有关。 非球形分子(如线状DNA)在电泳过程中受到更大的阻力,即粒子的泳动度与粒子形状有关。
电泳槽配置
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电泳槽一般分为三部分:1,电泳槽外壳;2,电泳槽主体;3,电泳槽附件。电泳槽外壳一般使用进口的优质PC料,透明度高,耐高温,便于观察。电泳槽主体是电泳槽的核心部分,水平核酸电泳槽生产厂家,用来承载电泳凝胶,形成含有正负极的直流电场,从而能让样品在凝胶内分成电泳条带,水平核酸电泳槽厂商,终实现样品的电泳分离。电泳槽附件主要有:凝胶玻璃板、加样梳、制胶器、凝胶托盘、电泳槽导线等,从用途和样品性质来说,电泳槽主要分为:蛋白电泳槽、蛋白转印电泳槽和核酸电泳槽三大类别。
蛋白电泳样品的浓缩效应
1:凝胶孔径的不连续性:
浓缩胶为大孔胶;分离胶为小孔胶。在电场作用下,样品颗粒在
大孔胶中泳动的阻力小,移动速度快;当进入小孔胶时,受到的阻
力大,移动速度减慢。因而在两层凝胶交界处,样品迁移受阻而压
缩成很窄的区带。
2: 电位梯度的不连续性:
电泳开始后,快离子的快速移动会在其后形成一个离子强度很低 的低电导区,使局部电位梯度增加,将蛋白质浓缩成狭窄的区带
大多数蛋白质在pH6.7或8.3时均带负电荷,在电场中,都向正极移动。以上内容由北京龙方科技为您提供,希望对朋友们有所帮助!