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蛋白电泳样品的浓缩效应

1：凝胶孔径的不连续性：

 浓缩胶为大孔胶；分离胶为小孔胶。在电场作用下，样品颗粒在

 大孔胶中泳动的阻力小，移动速度快；当进入小孔胶时，受到的阻

 力大，移动速度减慢。因而在两层凝胶交界处，样品迁移受阻而压

 缩成很窄的区带。

2： 电位梯度的不连续性：

  电泳开始后，快离子的快速移动会在其后形成一个离子强度很低   的低电导区，使局部电位梯度增加，将蛋白质浓缩成狭窄的区带

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电泳实验的技术原理

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电泳是带电颗粒在电场作用下，向着与其电荷相反的电极移动的现象。在一定pH条件下，每一种分子都具有特定的电荷（种类和数量）、大小和形状，在一定时间内它们在相同电场中泳动速度不同，各自集中到特定的位置上而形成紧密的泳动带。这就是带电粒子可以用电泳技术进行分离、分析和鉴定的基本原理。

带电颗粒在电场中泳动的速度称迁移率或泳动度。

 电泳时，带电颗粒（球形）在介质中受力平衡匀速运动，则有：

v =  F阻/f  = FE/f  = E·q/f  =  E·q/(6π·r·η)

       v — 泳动度               F阻 — 颗粒所受阻力

       E — 电场强度             q — 颗粒所带电荷

       r — 颗粒半径             η — 介质黏度

       FE — 颗粒所受电场力      f — 摩擦系数

由上式可见：泳动度与球形分子半径、介质粘度、颗粒所带电荷以及电场强度有关。  非球形分子（如线状DNA）在电泳过程中受到更大的阻力，即粒子的泳动度与粒子形状有关。

影响电泳实验泳动速度的重要因素——支持物

    电泳实验多在固体支持物上进行，使样品中的不同组分形成不同的区带，电泳槽，称区带电泳。电泳结束后，支持物可以方便地进行染色等后续处理。

   对支持物的一般要求是均匀，吸附力和电渗小，机械性能好，便于染色或紫外光下检测。常用支持物有SDS——PAGE凝胶，琼脂糖凝胶、滤纸，醋酸纤维素薄膜等 ，   支持物性质不同也会影响泳动速率，如琼脂糖和聚酰胺凝胶都有大小不同的筛孔，在筛孔大的凝胶中溶质颗粒的泳动速率快，反之则慢。