梯度凝胶生成系统
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产品特点:
梯度胶生成系统可灌制丙烯酰胺梯度凝胶,容量为40-175ml,可在Mini-PROTEAN3多板凝胶灌胶器中灌制多达12块厚度为0.75、1.0或1.5mm的凝胶。当灌制凝胶数少于12块时,丙烯模块可充当空间填充物。您可通过梯度凝胶生成系统从多板制胶器底部注入凝胶,灌制可重复性的梯度凝胶。
产品配置表:
1. 梯度胶生成仪
2. 多板制胶器
3. 恒流泵
4.磁力搅拌器
核酸电泳凝胶的制备和电泳步骤
操作方法如下:
(1) 根据所需要的凝胶的大小将相应的凝胶托盘按正确位置放置在制胶器内;
(2) 称取适量琼脂糖,电泳槽哪家好,置电泳缓冲液中,加热使琼脂糖溶解;
(3) 待溶液冷至60℃,加入10mg/ml EB贮存液,使终浓度达0.5mg/ml;
(4) 在距离胶模底板0.5-1mm处放置电泳梳,将琼脂糖溶液倒入胶模中,厚度约3-5mm,注意避免产生气泡;
(5) 凝胶完全凝固后,电泳槽生产厂家,移去梳子和透明胶,将凝胶放入电泳槽。加入TBE缓冲液使恰好没过胶面约1mm;
(6) 将DNA样品与1/6体积加样缓冲液混合后,加入样品槽中;
(7) 接通电源,使样品槽在负极端,用1-5v/cm的电压,电泳适当时间;
(8) 电泳结束后,可将含EB的凝胶直接放在紫外线检测仪上观察,并拍照记录,电泳槽,也可将不含EB的凝胶在0.5μg/ml的EB溶液中染色30-45分钟,再如上观察和拍照,记录结果。
影响核酸电泳分辨率的重要因素
研究结果表明:在低浓度、低电压下,分离效果较好。在低电压条件下,电泳槽厂家,线性DNA分子的电泳迁移率与所用的电压呈正比。但是,在电场强度增加时,较大的DNA片段迁移率的增加相对较小。因此随着电压的上升,电泳分辨率反而下降,为了获得电泳分离DNA片段的所需分辨率,电场强度不宜大于15V/cm。一般在5-10v之间。 电泳系统的温度对于DNA在琼脂糖凝胶中的电泳行为没有显著的影响。通常在室温下进行电泳,只有当凝胶浓度低于0.5%时,为增加凝胶硬度,可在4℃,进行电泳。
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